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biologia:esperienze:estrazione_del_dna_dal_kiwi

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Linea 30: Linea 30:
 //​Preparazione del gel di agarosio:// //​Preparazione del gel di agarosio://
   * Pesare 1g di agarosio e aggiungere 100 ml di tampone (TAE diluizione 10X)   * Pesare 1g di agarosio e aggiungere 100 ml di tampone (TAE diluizione 10X)
-  * Pesare la beuta contenente la soluzione ​precedente, registrare la tara e porre sulla piastra riscaldante.  +  * Pesare la beuta contenente la soluzione, registrare la tara e porre sulla piastra riscaldante.  
-  * Ripesare la beuta e nel caso in cui a seguito dell’evaporazione ​del tampone, il peso della beuta fosse meno di quello iniziale, aggiungere acqua fino a raggiungerlo ​nuovamente;​ +  * Ripesare la beuta enel caso in cui a seguito dell’evaporazione ​dell'​acqua, il peso della beuta fosse meno di quello iniziale, aggiungere acqua fino a raggiungere ​nuovamente ​il peso
-  * Versare la soluzione nel lettino del supporto elettroforetico e lasciarlo solidificare;+  * Versare la soluzione nel lettino del supporto elettroforetico, inserire il pettinino in modo tale da formare i pozzetti per il caricamento dei campioni ​lasciare che il gel solidifichi;
  
 //​Estrazione del DNA:// //​Estrazione del DNA://
   * Tagliare il Kiwi a pezzettini e ridurlo in poltiglia all’interno di un sacchetto di plastica;   * Tagliare il Kiwi a pezzettini e ridurlo in poltiglia all’interno di un sacchetto di plastica;
-  * Prendere due becker: nel primo aggiungere ​100ml di acqua con 3g di NaCl, nel secondo aggiungere 3 cucchiai di sapone per piatti e 30 ml di H2O; +  * Prendere due becker: nel primo aggiungere ​100 ml di acqua con 3 g di NaCl, nel secondo aggiungere 3 cucchiai di sapone per piatti e 30 ml di H2O; 
-  * Aggiungere 10 ml di soluzione salina ​nella poltiglia di kiwi e agitare ( i carboidrati e le proteine si separeranno dal DNA) +  * Aggiungere 10 ml di soluzione salina ​alla poltiglia di kiwi e agitare (i carboidrati e le proteine si separeranno dal DNA) 
-  * Filtrare il miscuglio, prelevare 1 ml e unirlo a 4 ml di H2O in una provettaaggiungere 10 ml di etanolo;+  * Filtrare il miscuglio ​con un pezzo di garza posto su un cilindro, prelevare 1 ml del filtrato ​e unirlo a 4 ml di H2O in una provetta. Quindi ​aggiungere 10 ml di etanolo;
  
 //Corsa elettroforetica://​ //Corsa elettroforetica://​
Linea 56: Linea 56:
 6. Osservazione 6. Osservazione
  
-Durante l’esperimento,​se i campioni caricati nei pozzetti fossero stati composti da DNA puro avremmo osservato la loro migrazione verso il polo positivo del campo elettroforetico. Nel nostro caso i campioni sono migrati verso il polo negativo indicando la presenza di istoni,carichi ​positivamente.  ​+Durante l’esperimento,​se i campioni caricati nei pozzetti fossero stati composti da DNA puro avremmo osservato la loro migrazione verso il polo positivo del campo elettroforetico. Nel nostro caso i campioni sono migrati verso il polo negativo indicando la presenza di istoni, ​proteine basiche cariche ​positivamente ​con funzione strutturale responsabili dell'​impacchettamento del DNA nel nucleo.  ​
  
biologia/esperienze/estrazione_del_dna_dal_kiwi.txt · Ultima modifica: 2019/09/23 14:30 (modifica esterna)